HibriGen Covid-19 RT-PCR Tespit Kiti, insan nazofaringeal aspirat/lavaj, bronkoalveolar lavaj, nazofaringeal sürüntü, orofaringeal sürüntü ve balgam örneklerinden elde edilen RNA yolu ile SARS-CoV-2 (2019-nCoV) virüsünün kalitatif olarak tespit edilmesi için kullanılır.
Kitin çalışma yöntemi, SARS-CoV-2 (2019-nCoV) virüsüne ait RNA’dan cDNA eşlenmesi (Reverse Transcription) ve cDNA’nın gerçek zamanlı amplifikasyonu (PCR) basamaklarını tek bir adımda toplayan, tek adımda RT-PCR (gerçek zamanlı PCR) teknolojisidir.
HibriGen Covid-19 RT-PCR Tespit Kitinde bulunan primerler ve problar, hedef bölgeler olarak SARS-CoV-2 (2019-nCoV) virüsünün korunmuş RdRp geninin (FAM), N geninin (Hex) ve kontrol olarak insan RPII (Cy5) dizilerine özgü, özel olarak, tek adımdan RT-PCR teknolojine uygun bir şekilde tasarlanmıştır.
50 Test | 100 Test | 200 Test | 500 Test | 1000 Test | 2000 Test | |
2X One Step RT-PCR Mix | 1x500 ul | 1x1 ml | 2x1 ml | 5x1 ml | 10x1 ml | 20x1 ml |
5X Primer Probe Mix | 1x200 ul | 1x400 ul | 1x800 ul | 2x1 ml | 4x1 ml | 8x1 ml |
20 µl’lik total reaksiyon hacmi için;
İçerik | Miktar | Son Konsantrasyon |
2X One Step RT-PCR Mix | 10 ul | 1X |
5X Primer Probe Mix | 4 ul | 1X |
Örnek | 6 ul |
1- Hazırlanan RT-PCR örneği hafifçe karıştırılır ve tüpün çeperlerinde kalan damlaların tamamen tüpün dibine toplanması için kısa süre santrifüj edilir.
2- RT-PCR uygulaması için aşağıdaki termal siklus koşulları uygulanır.
Döngü Sayısı | Sıcaklık | Süre |
1 | 55°C | 15 dk |
1 | 95°C | 1 dk |
45 |
94°C | 5 sn |
60°C | 20 sn | |
FAM/HEX/Cy5 okuma |
FAM | HEX | CY5 | Yorum |
+ | + | + | Pozitif |
- | - | + | Negatif |
+ | + | - | Verimsiz RNA izolasyonu / Pozitif |
- | + | + | Pozitif |
+ | - | + | Pozitif |
- | - | - | Tekrar |